|
|
HPLC bioaktivních látek
Lukšanová, Aneta ; Kubíček, Vladimír (vedoucí práce) ; Lázníčková, Alice (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Biofyziky a fyzikální chemie Školitel: Ing. Vladimír Kubíček, CSc. Student: Aneta Lukšanová Název diplomové práce: HPLC bioaktivních látek Diplomová práce popisuje hledání podmínek pro HPLC analýzu midazolamu a jeho dvou metabolitů - 1-hydroxymidazolamu a 4-hydroxy midazolamu, validaci metody a hledání vhodného vnitřního standardu. HPLC analýza probíhala na reverzních fázích, byla použita kolona POROSHELL 120 EC-C18, 3.0 X 100 NM, 2.7 µm a jako mobilní fáze se osvědčila směs tvořená acetonitrilem a roztokem octanu amonného o pH 4.5 v poměru 35/65. Detekce byla provedena diode array detektorem při vlnových délkách 223 a 272 mm. Kolona byla termostatována na 25 řC, čas analýzy byl 10 minut. Rychlost průtoku mobilní fáze byla 0.700 ml/min. Jako vnitřní standard se osvědčil diazepam. Metoda byla validována na základě požadavku zadavatele pro stanovení 1- hydroxymidazolamu a 4-hydroxymidazolamu v potkaní plazmě. V rámci validace byly ověřeny následující parametry: přesnost, správnost, kvantitativní limit, linearita a selektivita.
|
|
|
HPLC bioaktivních látek
Lukšanová, Aneta ; Kubíček, Vladimír (vedoucí práce) ; Lázníčková, Alice (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Biofyziky a fyzikální chemie Školitel: Ing. Vladimír Kubíček, CSc. Student: Aneta Lukšanová Název diplomové práce: HPLC bioaktivních látek Diplomová práce popisuje hledání podmínek pro HPLC analýzu midazolamu a jeho dvou metabolitů - 1-hydroxymidazolamu a 4-hydroxy midazolamu, validaci metody a hledání vhodného vnitřního standardu. HPLC analýza probíhala na reverzních fázích, byla použita kolona POROSHELL 120 EC-C18, 3.0 X 100 NM, 2.7 µm a jako mobilní fáze se osvědčila směs tvořená acetonitrilem a roztokem octanu amonného o pH 4.5 v poměru 35/65. Detekce byla provedena diode array detektorem při vlnových délkách 223 a 272 mm. Kolona byla termostatována na 25 řC, čas analýzy byl 10 minut. Rychlost průtoku mobilní fáze byla 0.700 ml/min. Jako vnitřní standard se osvědčil diazepam. Metoda byla validována na základě požadavku zadavatele pro stanovení 1- hydroxymidazolamu a 4-hydroxymidazolamu v potkaní plazmě. V rámci validace byly ověřeny následující parametry: přesnost, správnost, kvantitativní limit, linearita a selektivita.
|
|
|
Oxidace návykové látky fluoromethoxyacetyl fentanylu
Krejčí, Michaela ; Kubíček, Vladimír (vedoucí práce) ; Nováková, Veronika (oponent)
6 1. ABSTRAKT Fluoromethoxyacetyl fentanyl (FMAcF) je nová psychoaktivní látka, která se řadí do skupiny nově ilegálně syntetizovaných derivátů fentanylu, které se dostávají od roku 2009 na evropský drogový trh. Cílem bylo definovat elektrochemické chování látky FMAcF a navrhnout možné oxidační mechanismy. V této studii byly použity elektrochemické metody a UV-Vis spektroelektrochemie ke studiu oxidace psychoaktivní látky, které byly doplněny vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií s detektorem diodového pole. FMAcF ve vodném prostředí poskytovala jeden oxidační pík, jehož potenciál závisel na pH. Za studovaných podmínek se látka neredukovala. UV-Vis spektroelektrochemie ukázala vznik reakčního meziproduktu. Látka byla vyelektrolyzována a byly zjištěny UV-Vis absorpční spektra produktů. Byl navržen oxidační mechanismus látky. V budoucnu bude provedena inkubace s jaterními mikrosomy pro zjištění metabolických cest. Klíčová slova: Cyklická voltametrie, Oxidace, Bioaktivní látka, Fentanyly, Fluoromethoxyacetyl fentanyl
|
|
|
Charakterizace32,33-didehydroroflamykoinu - sekundárního metabolitu Streptomyces durmitorensis
Koukalová, Alena ; Černý, Jan (vedoucí práce) ; Konopásek, Ivo (oponent)
Streptomycety jsou půdní Gram-pozitivní vláknité bakterie, produkující širokou škálu pigmentů a biologicky aktivních látek včetně makrolidových antibiotik. Některé z nich jsou využívány v lékařství jako antibiotika a antimykotika, jiné se uplatňují v biologickém výzkumu jako molekuly vhodné pro fluorescenční značení membrán a detekci cholesterolu. Aktinomyceta Streptomyces durmitorensis (kmen MS405T ) je bakterie izolovaná z půdních vzorků národního parku Durmitor v Černé Hoře. Produkuje sekundární metabolit 32,33-didehydroroflamykoin (DDHR), který je strukturně velmi podobný roflamykoinu a příbuzný s široce využívaným makrolidem filipinem. DDHR vykazuje cytotoxickou aktivitu vůči savčím buňkám a kvasinkám Saccharomyces cerevisiae kmene EGY48, zároveň má zajímavé fluorescenční vlastnosti. Interaguje s buněčnými membránami, díky své fluorescenci umožňuje vizualizovat některé membránové struktury (např. lysozomy), způsobuje desintegraci membrán, což vede k přestavbě aktinového a tubulinového cytoskeletu a při vyšších koncentracích k nekróze buněk. Po vazbě na cholesterol v membránách se snižuje intenzita fluorescence DDHR. Molekula se vyznačuje schopností vizualizovat aberantní lysozomy, čehož lze potenciálně úspěšně využít v diagnostice některých lysozomálně střádavých chorob.
|
|
|
Cytostatický efekt nostatinu A a jeho přírodních analogů na buněčnou linii HeLa
VICKOVÁ, Kateřina
Cyanobacterial secondary metabolites are a rich source of bioactive compounds with potential utilization in pharmacology. The aim of this study was to evaluate the effect of the novel compound nostatin A isolated from the cyanobacterium Desmonostoc muscorum. Project was focused on the extraction, purification and characterization of the cytostatic effect caused by this novel compound and its naturally occurred structural analogues. The cytostatic activity of nostatin A and its analogs was evaluated in HeLa cell line. Experiments based on microscopy, flow cytometry and HPLC-HRMS techniques were performed in order to clarify the cytostatic effect of nostatin A in HeLa cells and its mechanism of the action.
|
|
|
Charakterizace32,33-didehydroroflamykoinu - sekundárního metabolitu Streptomyces durmitorensis
Koukalová, Alena ; Černý, Jan (vedoucí práce) ; Konopásek, Ivo (oponent)
Streptomycety jsou půdní Gram-pozitivní vláknité bakterie, produkující širokou škálu pigmentů a biologicky aktivních látek včetně makrolidových antibiotik. Některé z nich jsou využívány v lékařství jako antibiotika a antimykotika, jiné se uplatňují v biologickém výzkumu jako molekuly vhodné pro fluorescenční značení membrán a detekci cholesterolu. Aktinomyceta Streptomyces durmitorensis (kmen MS405T ) je bakterie izolovaná z půdních vzorků národního parku Durmitor v Černé Hoře. Produkuje sekundární metabolit 32,33-didehydroroflamykoin (DDHR), který je strukturně velmi podobný roflamykoinu a příbuzný s široce využívaným makrolidem filipinem. DDHR vykazuje cytotoxickou aktivitu vůči savčím buňkám a kvasinkám Saccharomyces cerevisiae kmene EGY48, zároveň má zajímavé fluorescenční vlastnosti. Interaguje s buněčnými membránami, díky své fluorescenci umožňuje vizualizovat některé membránové struktury (např. lysozomy), způsobuje desintegraci membrán, což vede k přestavbě aktinového a tubulinového cytoskeletu a při vyšších koncentracích k nekróze buněk. Po vazbě na cholesterol v membránách se snižuje intenzita fluorescence DDHR. Molekula se vyznačuje schopností vizualizovat aberantní lysozomy, čehož lze potenciálně úspěšně využít v diagnostice některých lysozomálně střádavých chorob.
|
host ::
RSS.